做了二代试管，为什么还是不受精？

随着人类辅助生殖技术的发展，常规体外受精（IVF）已经可以满足大部分患者的需求，第一代试管婴儿（IVF）的受精率通常在70%-85%。但是仍然有少数患者出现卵母细胞不受精的现象，称为完全受精失败。

有5%-15%的IVF周期，虽然精液常规检查的指标是正常的，但仍然会发生不受精，一般所认识的原因是精子缺乏正常受精能力，采用卵胞浆内单精子注射（ICSI），即第二代试管婴儿技术，就可获得受精。

理论上卵胞浆内单精子显微注射（ICSI）的受精率应为100%，而实际上对于这类第一代不受精者，第二代的受精率也仅为70%左右。

为什么会发生ICSI受精失败呢，原因有哪些，该怎么处理呢？

1、什么是受精失败？

ICSI 与传统 IVF 在受精过程中的作用不同，它避开了精卵结合受精过程的三大屏障：顶体反应（精子穿过卵放射冠）、精子穿过卵透明带、精子穿过卵细胞质膜，显著提高受精率。

ICSI具有单精受精率高及不受精子浓度、形态、活力的影响等优点。

但ICSI 技术不能解决所有的受精失败，辅助生殖实验室仍然存在难以预测和不明原因的 ICSI 后全部受精失败（TFF）与受精率低的情况。

据文献报道，ICSI后TFF发生率大概为1.3% ——4.0% 。

2、ICSI受精失败的原因

卵母细胞质量

ICSI 是在去除卵冠丘颗粒细胞后进行的，可准确选择已排出第一极体的成熟卵母细胞（MⅡ期卵）进行显微授精操作。

但是第一极体排出仅是卵母细胞核成熟的标志，而卵子的成熟包括胞核及胞质的成熟，如果卵子胞质不成熟或卵母细胞本身存在某些缺陷就可能引起完全受精失败。

精子缺陷

目前 IVF 实验室 ICSI 时一般选择形态相对正常的精子，但仍然不能完全避免选择的ICSI 精子存在微小畸形。

畸形精子或者存在功能缺陷的精子，可能会导致受精失败或早期合子发育障碍。

受精激活障碍

受精激活主要包括：

① 卵母细胞的激活：

可由精子完成，也可由物理化学刺激完成，钙离子载体辅助卵子激活是目前辅助生殖实验室中 ICSI 受精失败最常用的处理措施；

②精子激活，以精核去致密、雄原核形成和发生DNA合成等为标志。

精子进入成熟卵母细胞后，需要在细胞质中某些因子的作用下完成这一系列过程。如果精子头部去致密失败或鱼精蛋白缺陷均可导致精子激活障碍，从而引起受精失败。

ICSI 操作技术原因

ICSI 的关键是能够成功地穿破卵膜，将被制动的单个精子置于卵母细胞胞质内。

在操作过程中，精子没有注射到卵中，或操作过程对精子和卵子的机械刺激不充分，导致精子或卵子未被激活，也会导致受精失败。

但是这种原因往往只是操作的极个别卵子可能存在的问题，一般不会导致所有的卵子都受精失败。

3、遇到受精失败，该怎么办？

改善临床促排方案，改善卵子质量：

卵母细胞核和细胞质的不成熟状态可能抑制卵子对精子PLCζ激活的反应。在临床实践中应优化促排卵方法尽可能改善卵子质量，适当增加卵子数量。

改善精子质量，选择形态正常的活精子：

严重精子异常者可在助孕前改善精子质量，ICSI时选择形态正常的活精子，对“死精子”可以借助精子尾部低渗膨胀试验、Laman光谱显微镜检验，也可采用形态选择性卵胞浆内单精子注射（IMSI）。

卵母细胞辅助激活（AOA）：

AOA技术可以有效克服部分完全受精失败或受精率低下，获得正常发育的胚胎，是目前临床上常用的较为有效的处理。AOA技术还应用于圆头精子症、和不活动精子和严重形态异常精子。

注射重组人PLCζ：

向卵母细胞内注射rhPLCζ可以改善部分由于激活失败导致的ICSI受精障碍。

写在最后：ICSI受精失败的发生率为1%-3%，在临床上少见但处理困难。

获卵数少、卵子形态和精子严重异常者具有较高的ICSI受精失败风险，应结合临床和实验室结果综合分析原因，采取相应的合理处置。